日本使节团领头的还是老熟人川路圣谟，自从川路圣谟在与太平天国接触后向幕府上了著名的《川路状》后，日本幕府一直和太平天国保持了友好关系。在太平天国和俄国长达八年的远东北疆冲突战事中，日本一直保持和太平天国的一致步调，很多日本武士被征召随同太平军出征，共同与俄国人作战。

虽然通过抱太平天国的大粗腿，日本一改被俄国压迫的现状，取得了不少好处，但总体上还是被列强欺压的状况并未改善，而太平天国在结束英法俄战争之后，似乎也站在列强一边一同欺负日本。在这种情况下，国内的倒幕派也喊出了效仿太平天国的口号，将洪韵儿师夷长技以制夷的口号改了改，称作尊王攘夷，他们希望能向太平天国那样，发动起义结束国内软弱的幕府，然后与列强对抗，希望能发生太平天国那样的奇迹，战胜强大的列强，从而使日本一跃成为东方强国。

自从1853美国以武力胁迫日本开国以来，日本与俄、英、荷等国都签署了开国的条约，日本闭关锁国的体制崩溃。1858年幕府大老井伊直弼迫于外国压力，不待天皇敕许，迳自签订《日本国美利坚合众国修好通商条约》，主张攘夷的某些藩主和志士通过与幕府有矛盾的公卿策动天皇下诏，拒不批准签约，宣扬尊王攘夷。

1858年10月至1859年，幕府在京都、江户等地大肆逮捕尊王攘夷派志士，造成安政大狱。1860年攘夷派的水户、萨摩两藩的18名浪士为安政大狱的被害者复仇，刺杀大老井伊直弼于江户，史称樱田门外之变。

尊王攘夷运动的中心在长州藩，领袖有吉田松阴及其门生高杉晋作、久坂玄端等。尊王攘夷派的成员有各地的下级武士、乡士、豪农豪商、村吏、神官、国学者以及公卿中要求改革幕政或与幕府有矛盾的人物。1862年底至1863年初，尊王攘夷派策动天皇下诏，令幕府定期宣布攘夷，废约、闭港、驱逐外国人，当然这当中并不包含与日本常年通商的中国人。1863年1月31日，高杉晋作等火烧英国公使馆。6月6日，幕府被迫答应天皇，定于6月25日开始实行攘夷。6月24日幕府通告各国公使将关闭港口。

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